?上海易色醫療科技有限公司

Shanghai Yise Medical Technology Co.,Ltd.

HighMax高效轉染試劑（HighMax Transfection Reagent）

使用說明書（版本PC05）

貨號

儲存條件

?本轉染試劑在4℃可保存至少2年。

產品原理

本公司開發的HighMax高效轉染試劑，是新一代的DNA轉染技術，可用于各種真核細胞系的DNA轉染，如HEK293、CHO、COS、NIH3T3等。此外，本試劑也可用于懸浮細胞（如淋巴細胞、昆蟲細胞等）的轉染。

產品優點

HighMax高效轉染試劑，具有如下顯著的優勢：

1. 轉染效率高，可用于絕大部分細胞的轉染。

2. 即可用于貼壁細胞的轉染，也可用于懸浮細胞的轉染。

3. 培養液中的血清和抗生素不會影響轉染的效率。

4. 對細胞的毒性極低。

5. 操作簡單、重復性好。

6. 本轉染試劑非常適合用于腺病毒和慢病毒的包裝。

7. 與進口轉染試劑相比，價格相對較低，性價比高。

使用方法

1、細胞鋪板：

轉染前18-24小時進行細胞的鋪板，以便在轉染時，貼壁細胞的密度大約在80%左右。

注：培養液中的血清和抗生素不影響轉染效率。

2 、HighMax-DNA復合物的制備和轉染的具體方法：

轉染前將所有試劑置于室溫10分鐘。下面，以轉染35 mm培養皿為例，說明轉染的具體方法（如果在別的培養器皿中進行轉染，各試劑的使用量見表1）：

（1） 在轉染前30-60分鐘，將培養液更換成含血清和抗生素的新鮮培養液。

（2） 將1 μg 質粒DNA稀釋到50 μL無血清的高糖DMEM，用移液槍吹吸3-4次。

（3） 將3 μL HighMax轉染試劑稀釋到50 μL無血清的高糖DMEM，用移液槍吹吸3-4次。

注：不能使用含血清的培養基（包括Opti-MEM）進行DNA和HighMax轉染試劑的稀釋！因為HighMax-DNA轉染復合物的形成過程不能含有血清。

（4） 將稀釋好的HighMax轉染試劑一次性全部加入到已稀釋好的質粒DNA中，立即用移液槍吹吸3-4次。

注：此混合的順序不能反向進行！

（5） 室溫放置10-15分鐘，以形成HighMax-DNA復合物。

（6） 將上述100 μL HighMax-DNA轉染復合物均勻滴入到含細胞的培養皿中。輕輕晃動培養皿，讓HighMax-DNA復合物分散均勻。

（7） 轉染后12-18小時，去除含HighMax-DNA復合物的培養液，加入含血清和抗生素的新鮮培養液。

（8） 24-48小時后檢測轉染的效率。

表1. 不同培養器皿中，各試劑的使用量

轉染效率

圖1. HighMax轉染HEK293的效果（GFP），轉染效率大約為60-80%。